蛋白定量方法的选择受缓冲液的影响 -益择网-专业的仪器网上选购商城

常用的蛋白定量方法有直接测280nm吸光值法、比色法和荧光法。选择哪种定量方法取决于多种因素，其中蛋白大概的浓度和蛋白石否经过纯化是需要考虑的因素。另一个常被忽视的因素是溶解蛋白所用的缓冲液，这个因素也应该被考虑到。

本研究检测了多种常用蛋白缓冲液的光谱图，尤其是它们在280nm的光吸收。通过用纯的去离子水做的blank，即可直接测出缓冲液的光谱图。280nm的吸光值可以帮助我们判断此种缓冲液是否适合用A280法检测蛋白浓度。

本研究还考察了A280的方法检测溶解在RIPA缓冲液（裂解液）中蛋白的浓度这种方法的准确性。这种缓冲液在UV区有较大的光吸收，是典型的不适合用A280方法。同时通过直接测A280和BCA比色法检测溶解在PBS或RIPA缓冲液中的牛血清蛋白的浓度，以评估错误的缓冲液对检测结果的影响。