猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育和鉴定-益择网-专业的仪器网上选购商城

刘长明，张超范，危艳武，谭斌，陆月华，谷守林
(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室，黑龙江哈尔滨150001)

摘要：从临床表现为仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)淋巴组织病料，经聚合酶链式反应(PCR)
证实为猪圆环病毒2型(PCV2)感染，采用无污染的猪肾细胞系(PK15)分离培养，并连续传代培育成一株
细胞培养适应毒，命名为PCV2／LG株。分离毒株经细胞培养，于第25代后毒价显著升高，于第35代毒价可达
10 6TCID~／mL。采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)、免疫电镜技术、分子克隆及核酸序列分析等鉴
定表明，分离株感染细胞后病毒抗原主要分布在细胞核及细胞质中；病毒感染的阳性细胞呈散在分布，阳性细
胞数可达5O％以上；免疫电镜观察到与PCV2特异抗体结合形成的病毒免疫复合物呈实心小颗粒样粒子团，病
毒粒子直径约为17 nm；病毒抗原基因组由1768个核苷酸组成，与GenBank登录的8个PCV2基因组序列同源性达
96．2％以上。用2 mL的病毒细胞培养物 (1O 叮CID L)接种3O日龄PCV2抗体阴性仔猪3头，可引起典型
PMWS临床症状。本研究为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、诊断及分子生物学等研究奠定了基础。
关键词：猪圆环病毒2型；病毒分离鉴定；毒株培育

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猪圆环病毒2型细胞培养适应毒株的培育和鉴定

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