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猪圆环病毒2 型猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒 三重PCR检测方法的建立
2013-04-08 16:29:59 益择发布
方 立1 ,2 , 徐 辉2 , 陈伟杰2 , 赵灵燕2 , 倪柏锋2 , 方维焕1
(1. 浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室,浙江杭州 310029 ;
2. 浙江省畜牧兽医局, 浙江杭州 310020)
摘要: 针对猪圆环病毒2 型( PCV2) ORF2 、猪伪狂犬病病毒( PRV) gD 和猪细小病毒( PPV)(1. 浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室,浙江杭州 310029 ;
2. 浙江省畜牧兽医局, 浙江杭州 310020)
VP2 基因保守区域,设计了特异性引物,在分别建立单一病毒基因PCR 检测方法的基础上,通过
对3 组引物的比例和浓度、dN TPs 和Mg2 + 浓度、退火温度等条件的优化,建立了针对上述3 种病
毒的三重PCR 检测方法。敏感性试验表明,应用该方法最低可检测到4 ×10 - 4 ng/μL 的PRV 双
链DNA 模板和2 ×10 - 5 ng/μL 的PCV2 和PPV 单链DNA 模板。对21 份自然感染病猪样品的
检测结果表明,该三重PCR 检测结果与单一PCR 检测的结果完全符合。试验结果显示,建立的三
重PCR 方法可用于3 种DNA 病毒的同时检测,具有快速、准确的特点,有临床应用前景。
关键词: 猪圆环病毒2 型; 猪伪狂犬病病毒; 猪细小病毒; 三重PCR
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